組換えプラスミドとは何ですか？

プラスミドは、多くの細菌に見られる円形のDNAです。プラスミドの最も注目すべき特徴は、宿主の主要なDNAとは独立して複製することです。多くの場合、プラスミドは組換えクローン技術で使用され、新しく孤立した遺伝子をクローン化します。また、組換えプラスミドを使用して大量の既知の遺伝子を発現してRNAまたはタンパク質を得ることも非常に一般的です。このような組換え遺伝子発現は、バイオテクノロジー産業に不可欠です。他の多くの種類の細菌は、そのようなプラスミドを抱くことができます。これらの自己複製DNAのビットは、異なる種類の細菌間で自然に移動する可能性があります。それにもかかわらず、組換えプラスミドを他の種類の細菌に導入することが困難な場合がありました。dDNAを他の細胞に導入するための主要な手順は、形質転換として知られています。これは、バクテリアが化学物質で処理され、外来DNAを吸収する可能性が高くなります。別の手法には、電流で細菌に衝撃を与えることが含まれます。これはエレクトロポレーションとして知られています。多くの場合、DNAが特定の組織または生物から最初に分離されると、それはプラスミドに変換されてライブラリを作成します。次に、DNAを個々のコロニーから抽出できます。次に、DNAシーケンスによってスクリーニングして、データベースに配列が存在する場合、どのタイプの遺伝子が存在するかを決定できます。不明な機能を持つ遺伝子がクローン化されることがあります。この遺伝子は、過剰発現ベクターである組換えプラスミドにクローン化できます。それらは、特に大量のRNAまたはタンパク質を生成するように設計されています。これは、以前は死体からのみ利用可能であることが多い組換えヒトタンパク質にとって特に価値があり、特定の遺伝子の機能を研究することが非常に困難でした。プラスミドには選択可能なマーカーが必要です。これにより、遺伝子を使用したセルを選択できます。通常、マーカーを持つ遺伝子を欠く細胞の集団は、それを運ぶ細胞の量を大幅に上回っています。一般に、組換えプラスミドは抗生物質に対する耐性があるか、特定のアミノ酸の非存在下で成長する可能性があります。さらに、組換えプラスミドでは、制限酵素がDNAを切断してクローンベクターに遺伝子を挿入できるようにするための一連の特別な配列が必要です。遺伝子が起動して終了する場所に存在する必要がある特定のDNA配列に非常に特化した多くの制限酵素があります。さらに、遺伝子産物の過剰発現を促進するために特別に構築された細菌株を使用する新しいキットがあります。それらは、遺伝子を組換えプラスミドにクローン化すると、遺伝子から発現したタンパク質の容易な精製を可能にする方法と遺伝子をクローニングするための技術を組み合わせています。